تعتبر زراعة الخلايا والأجنة النباتية من طرق الحديثة والهامة والمفيدة في مجال علم النبات، وقد خرجت هذه الطريقة من دائرة الأبحاث إلى دائرة التطبيق العلمي فهذه التقنية تستخدم أساساً في الإکثار السريع للنباتات وذلک للحصول على أکبر عدد من النباتات الأمر الذي لا يمکن تحقيقه بأي طريقة من طرق التکاثر التقليدية وذلک في أي وقت من السنة و بأقل جهد وأقل حيز ممکن.
أجريت العديد من الأبحاث الأکاديمية التي أدت إلى معرفة کيفية تمييز وتکشف وتکوين الأعضاء أو الأجزاء النباتية المفصولة والمنماة في البيئات الصناعية فلکي ينمو الجزء النباتي يشترط أن يکون له القدرة على الانقسام الميتوزي حيث يعتبر اختبار الجزء النباتي المستعمل، وکذلک مرحلة نمو هذا الجزء ذات أهمية کبيرة في زراعة الأنسجة، وفي جميع الأحوال يجب تعقيم الجزء النباتي المستخدم قبل البدء في زراعة الأنسجة، ومن ثم توفير وسط نمو له، وتتم هذه الطريقة في ظروف على درجة عالية من التعقيم حيث أن البيئات المستخدمة تکون موطن خصب للکائنات الدقيقة في زراعة الأجنة النباتية يواجه الباحثون مشاکل عدة منها نوع البيئة المغذية ووسيلة التعقيم العالى التي تتطلبها هذه البيئات بالإضافة لتهيئة وتحفيز الأجنة للنمو.
أجرى هذا البحث بغرض دراسة إمکانية استبدال وسط النمو على بيئة الأجار، والذي يرتبط استخدامه بتوفير درجات عالية من التعقيم، وذلک بسبب القدرة السريعة للکائنات الدقيقة على النمو والتکاثر فيه, بوسط النمو مؤلف من ورق سليلوز (ورق الأسمنت) کوسط لنمو أجنة نبات البازلاء. نميت الأجنة على وسط الأجار ووسط الأوراق السليلوزية، وذلک لمقارنة النمو على الوسطين المستخدمين, عزلت الأجنة الناضجة من بذور نبات البازلاء وبعد تعقيمها تم تنميتها على وسط الورق السليلوزى وأخرى على وسط الأجار ترکت لتنمو في حاضنات مظلمة عند درجة حرارة 26oم لمدة أربعة أيام سجلت القراءات الخاصة بمقاييس النمو للنبات, ومن ثم عرضت الباردات النامية للتقسية، وذلک بنقلها في أصص صغيرة، وترکت لتنمو تحت ظروف متحکم بها معملياً, تم تسجيل القراءات الخاصة بمقاييس النمو بالإضافة لتقدير المحتوي اليخضوري.
بعد أربعة أيام من التقسية نقلت النباتات إلى ظروف البيئة الطبيعية، وترکت لتنمو لمدة أسبوع، وأيضاً تم تسجيل القراءات الخاصة بالأطوال والأوزان للنبات بالإضافة للمحتوى المائي وتقدير المحتوي اليخضوري للنباتات النامية, عوملت أجنة النباتات بترکيزي 1، 5 جزء في المليونمن حمض الجبريليک بغرض تحفيز نمو الأجنة، کما ترکت بعض الأجنة بدون معاملة حيث استخدمت هذه کشاهد.
بينت نتائج الدراسة أن الوسط المؤلف من ورق السليلوز يعتبر الأفضل لنمو الأجنة خاصة في الأيام الأربعة الأولى لنمو الأجنة حيث لوحظ الزيادات عالية المعنوية في الطول الکلي للنبات بالإضافة إلى تکون الأوراق في حين أن الأجنة النامية على وسط الأجار لم تبدي أي استجابة في زيادة الأطوال أو الأوزان. استخدام هرمون الجبريلين بترکيز (1) جزء في المليون للأجنة النامية على ورق السليلوز أدى للزيادة المعنوية للأطوال، وکذلک الوزن الرطب والمحتوى المائي، کما ظهرت کفاءة البادرات لتکوين الأوراق في حين استخدام هرمون الجبريلين للأجنة النامية على وسط الأجار لم يبد نفعاً خلال الأربعة أيام الأولى لنمو الأجنة. عند نقل البادرات إلى مرحلة التقسية لوحظ أن النباتات التي کانت تنمو على وسط الأوراق السليلوزية أظهرت استجابة في تحسين نمو النبات مقارنة بتلک النامية على وسط الأجار, تميل النباتات النامية على وسط الأوراق السليلوزية لإظهار تحسن في طول المجموع الجذري، کما وجد أن استخدام هرمون الجبريلين خلال مرحلة التقسية لا يجدي نفعاً حيث لم يتم ملاحظة أي فروقات معنوية بين نبات المقارنة والنبات المعاملة بالهرمون عليه فقد أوضحت نتائج الدراسة أن وسط الأوراق السليلوزية يمکن استخدامه کبديل عن وسط الأجار، وذلک يرجع لقدرة أجنة نبات البازلاء على النمو الجيد بداخله.
ABSTRACT:
Cells and embryos culture are new, important and useful methods in plant science scope. This method moved out from research to application scientific circuit. The technique of tissue culture uses the rapid propagation to produce large number of plants this cannot be actualize by classical propagation method which needs to specific time in the year and effort. Large number of scientific researchers have done that leaded know how can parts of plant differentiate and develop to organisms in artificial media. In order to, grow part of the plant. It should be capable of mitosis division where testing of used part of the plant and the growth stage of this part are important. In any case, should sterilize the used plant part before agriculture start then provide it with growth media. This requires that all equipment used in creating a cell and embryos culture must be sterilized to ensure contamination does not occur. In plant tissue culture researchers faces many problems as kind of nutrition media, high quality of sterilization that the. In addition to stimulation of embryos growth and activation of embryos to grow. This study was conducted in order to study possibility for alteration ager media to cellulose media (cement papers) for germination and growth of peas plant embryos. The mature embryos separated, sterilized then germinated in ager and cellulose media, in order to compare their growth in both media. Embryos left to grow in dark incubator at 26◦C for four days. Growth parameters recorded then all seedlings exposed to hardness stage by transferring them to the small pots. Seedlings left to grow four days under controlled conditions. Results of this study revealed that cellulose papers media is the best for embryos growth especially during the first four days (Incubation stage) where highly significant increases in total plant length; leaves formation had noted. In contrast, embryos that germinated in ager media did not showed any response in their length and weight. Treatment of embryos that grown on cellulose papers media by Gebberelic acid concentration of 1ppm significantly increased their lengths; fresh weight and water content, while, treatment of embryos, that grown on ager media, with the same concentration of Gibberellic acid was useless during the first four days (Incubation stage). After transfer the seedling to hardness stage, it had noted that seedlings grown in cellulose papers media improved their growth when they compared with seedlings that grown on ager media, also, the seedling slants to show an increase especially in the length of root. Treatment of seedlings by Gibberellic acid during the stage of hardness was not usefulness because it did not note any significant increases between controlled plants and the treated plants. The result of this study revealed to that cellulose papers can be used instead of ager media because embryos of peas plants improved their growth parameters.